钙黄绿素橙钠盐是美国AAT Bioquest生产的用于的试剂，Calcein AM 是流行的荧光探针之一，用于标记和监测活细胞的细胞功能。百萤生物是 的中国代理商，为您提供优质的钙黄绿素橙钠盐。

光谱：

实验方案;

使用细胞活力指标AM酯类

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。 它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。 DMSO储备溶液可以在20℃下干燥储存并避光。 在这些条件下，AM酯应稳定数月。

 以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该说明书仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。 

a）在高质量无水DMSO中制备2至5mM AM酯的储备溶液。非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加AM酯的水溶性。

注意：在稀释到上样缓冲液中之前，可将等体积的20％Pluronic®F-127溶液添加到细胞活力指示剂的DMSO储备溶液中。终的Pluronic®F-127浓度约为0.02％。

注意：不建议在Pluronic®F-127存在下长期储存AM酯。

b）在实验当天，要么将细胞活力的固体指示剂溶解在DMSO中，要么将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在您选择的缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系，建议终浓度范围为4至5μM的细胞活力指标。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。

c）如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可以在细胞培养基中加入丙磺舒（1-2.5 mM）或磺吡酮（0.1-0.25 mM），以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37℃下将细胞与AM酯孵育20分钟至1小时。

d）在不含细胞活力指示剂的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如果适用）中洗涤细胞以除去过量的探针。

注意：通过流式细胞术立即分析细胞样品，以确定在零时间没有洗涤的每个细胞的平均荧光。

e）在所需的Ex / Em波长下进行实验 。

图1所示。与钙黄绿素的形象活海拉细胞染色橙色?钠盐(# 22008)和钙黄绿素二乙酸橙?(# 22009)。钙黄绿素橙色?钠盐不能渗透完整活细胞

参考文献：

Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599--2610

Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)

Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1--8

Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322--331

Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81--88

Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1--8

Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

Authors: Anja Lena Thiebes, Stefanie Albers, Christian Klopsch, Stefan Jockenhoevel, Christian G Cornelissen
Journal: BioResearch open access (2015): 278--287

Authors: Shuai Wu, Zhuoyao Huang, Jianhui Yue, Di Liu, Ting Wang, Pierre Ezanno, Changshun Ruan, Xiaoli Zhao, William W Lu, Haobo Pan
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295--303