Amplite试剂盒(AAT Bioquest开发)是一系列基于荧光法或比色法的检测试剂盒,适用于多种生物分子和生化反应的定量分析。
一、Amplite? 试剂盒的核心优势
高灵敏度与宽动态范围
荧光法检测限低至 nM~pM级(如ATP检测灵敏度达0.1 nM),适合微量样本(如原代细胞、微量体液)。
比色法线性范围宽,适用于高浓度样本(如培养基中的葡萄糖)。
操作简便
?“Mix-and-Read” 设计:无需复杂步骤,多数试剂盒仅需一步孵育(10~30分钟)。
? 兼容高通量筛选(HTS),适合96/384孔板自动化检测。
优异的抗干扰能力
? 专利荧光染料(如 Resorufin、DDAO)可减少样本自发荧光干扰,提高信噪比。
? 部分试剂盒含内参校正(如双波长检测),适用于复杂样本(血清、组织匀浆)。
灵活适配性
? 提供荧光(Ex/Em 可调)和 比色(可见光检测)双平台选择,匹配不同实验室设备。
? 与哺乳动物细胞、细菌、植物样本兼容,且无需毒性溶剂(如DMSO)。
稳定性强
? 试剂预混优化,常温运输,4℃保存期长达6个月。
二、Amplite? 试剂盒的主要应用范围
1. 氧化应激与抗氧化研究
检测目标:H?O?、超氧阴离子(O??)、总ROS、抗氧化剂(如GSH)。
应用场景:
? 神经退行性疾病(如阿尔茨海默症)中的氧化损伤机制。
? 药物/天然产物的抗氧化能力评价(如筛选抗衰老化合物)。
2. 能量代谢监测
检测目标:ATP、葡萄糖、乳酸、NAD+/NADH。
应用场景:
? 肿瘤细胞糖酵解(Warburg效应)研究。
? 线粒体功能异常相关疾病(如糖尿病、代谢综合征)。
3. 细胞功能分析
检测目标:细胞活力、凋亡、增殖(如LDH、蛋白酶活性)。
应用场景:
? 抗癌药物毒性筛选(结合IC50计算)。
? 免疫细胞激活状态评估(如T细胞耗竭模型)。
4. 酶学与信号通路研究
检测目标:激酶、磷酸酶、蛋白酶(如Caspase-3)、乙酰胆碱酯酶。
应用场景:
? 激酶抑制剂开发(如EGFR、MAPK通路药物筛选)。
? 神经递质代谢调控(如乙酰胆碱降解速率检测)。
5. 微生物与感染研究
检测目标:细菌生物膜、β-内酰胺酶活性、硝酸还原酶。
应用场景:
? 抗生素耐药性机制研究。
? 益生菌代谢活性分析。
三、常见类型以及应用场景
1. 活性氧(ROS)与氧化应激检测
适用试剂盒
Amplite? Fluorimetric Hydrogen Peroxide (H?O?) Assay Kit(荧光法检测过氧化氢)
Amplite? Colorimetric Total ROS Assay Kit(比色法检测总活性氧)
应用
? 氧化应激研究(如细胞凋亡、炎症)
? 抗氧化剂活性评价(如药物筛选)
2. 葡萄糖代谢检测
适用试剂盒
Amplite? Fluorimetric Glucose Assay Kit(荧光法,高灵敏度)
Amplite? Colorimetric Glucose Assay Kit(比色法,适用于常规检测)
应用
? 细胞/培养基中葡萄糖消耗监测
? 糖尿病研究或糖代谢相关酶活性分析
3. 细胞活力与增殖检测
适用试剂盒
Amplite? Fluorimetric ATP Assay Kit(通过ATP含量间接反映细胞活力)
Amplite? Cell Viability Kits(基于荧光信号)
应用
? 药物毒性测试
? 肿瘤细胞增殖研究
4. 酶活性检测适用试剂盒
Amplite? Fluorimetric Protease Assay Kit(蛋白酶活性)
Amplite? Phosphatase/Alkaline Phosphatase (ALP) Assay Kits(磷酸酶/ALP活性)
应用
? 酶抑制剂筛选(如激酶、水解酶)
? 信号通路研究(如磷酸化/去磷酸化)
图示
图为使用NOVOstar酶标仪(BMG Labtech),在具有Amplite 荧光马来酰亚胺定量测定试剂盒的96孔板(黑色)中测量N-乙基马来酰亚胺剂量响应。