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Amplite试剂盒:高灵敏检测技术,赋能氧化应激与代谢研究

2025-07-09

Amplite试剂盒(AAT Bioquest开发)是一系列基于荧光法或比色法的检测试剂盒,适用于多种生物分子和生化反应的定量分析。

 

一、Amplite? 试剂盒的核心优势

 

高灵敏度与宽动态范围

荧光法检测限低至 nM~pM级(如ATP检测灵敏度达0.1 nM),适合微量样本(如原代细胞、微量体液)。

比色法线性范围宽,适用于高浓度样本(如培养基中的葡萄糖)。

 

操作简便

 

?Mix-and-Read” 设计:无需复杂步骤,多数试剂盒仅需一步孵育(10~30分钟)。

兼容高通量筛选(HTS),适合96/384孔板自动化检测。

 

优异的抗干扰能力

 

专利荧光染料(如 ResorufinDDAO)可减少样本自发荧光干扰,提高信噪比。

? 部分试剂盒含内参校正(如双波长检测),适用于复杂样本(血清、组织匀浆)。

 

灵活适配性

提供荧光(Ex/Em 可调)和 比色(可见光检测)双平台选择,匹配不同实验室设备。

与哺乳动物细胞、细菌、植物样本兼容,且无需毒性溶剂(如DMSO)。

 

稳定性强

试剂预混优化,常温运输,4℃保存期长达6个月。

 

二、Amplite? 试剂盒的主要应用范围

 

1. 氧化应激与抗氧化研究

检测目标:H?O?、超氧阴离子(O??)、总ROS、抗氧化剂(如GSH)。

 

应用场景:

? 神经退行性疾病(如阿尔茨海默症)中的氧化损伤机制。

药物/天然产物的抗氧化能力评价(如筛选抗衰老化合物)。

 

2. 能量代谢监测

检测目标:ATP、葡萄糖、乳酸、NAD+/NADH

 

应用场景

肿瘤细胞糖酵解(Warburg效应)研究。

? 线粒体功能异常相关疾病(如糖尿病、代谢综合征)。

 

3. 细胞功能分析

检测目标:细胞活力、凋亡、增殖(如LDH、蛋白酶活性)。

 

应用场景

抗癌药物毒性筛选(结合IC50计算)。

免疫细胞激活状态评估(如T细胞耗竭模型)。

 

4. 酶学与信号通路研究

检测目标:激酶、磷酸酶、蛋白酶(如Caspase-3)、乙酰胆碱酯酶。

 

应用场景:

激酶抑制剂开发(如EGFRMAPK通路药物筛选)。

? 神经递质代谢调控(如乙酰胆碱降解速率检测)。

 

5. 微生物与感染研究

检测目标:细菌生物膜、β-内酰胺酶活性、硝酸还原酶。

 

应用场景

? 抗生素耐药性机制研究。

? 益生菌代谢活性分析。

 

三、常见类型以及应用场景

 

1. 活性氧(ROS)与氧化应激检测

 

适用试剂盒

Amplite? Fluorimetric Hydrogen Peroxide (H?O?) Assay Kit(荧光法检测过氧化氢)

Amplite? Colorimetric Total ROS Assay Kit(比色法检测总活性氧)

 

应用

? 氧化应激研究(如细胞凋亡、炎症)

? 抗氧化剂活性评价(如药物筛选)

 

2. 葡萄糖代谢检测

适用试剂盒

Amplite? Fluorimetric Glucose Assay Kit(荧光法,高灵敏度)

Amplite? Colorimetric Glucose Assay Kit(比色法,适用于常规检测)

 

应用

细胞/培养基中葡萄糖消耗监测

? 糖尿病研究或糖代谢相关酶活性分析

 

3. 细胞活力与增殖检测

适用试剂盒

Amplite? Fluorimetric ATP Assay Kit(通过ATP含量间接反映细胞活力)

Amplite? Cell Viability Kits(基于荧光信号)

 

应用

? 药物毒性测试

? 肿瘤细胞增殖研究

 

4. 酶活性检测适用试剂盒

 

Amplite? Fluorimetric Protease Assay Kit(蛋白酶活性)

Amplite? Phosphatase/Alkaline Phosphatase (ALP) Assay Kits(磷酸酶/ALP活性)

 

应用

? 酶抑制剂筛选(如激酶、水解酶)

信号通路研究(如磷酸化/去磷酸化)

 

图示

使用NOVOstar酶标仪(BMG Labtech),在具有Amplite 荧光马来酰亚胺定量测定试剂盒的96孔板(黑色)中测量N-乙基马来酰亚胺剂量响应。