这种均质的cAMP分析试剂盒不需要洗涤步骤或乙酰化步骤。该测定基于荧光cAMP示踪剂和未标记的游离cAMP之间固定数目的抗cAMP抗体结合位点的竞争。游离cAMP从HRP-cAMP /抗cAMP抗体复合物中取代了荧光cAMP示踪剂。抗cAMP抗体用我们的TR Fluor Eu标记,而cAMP示踪剂包含我们的trFluor 650。在没有cAMP的情况下,trFluor 650-cAMP缀合物仅与TR Fluor Eu标记的抗cAMP抗体结合。但是,测试样品中未标记的游离cAMP竞争TR Fluor Eu标记的抗cAMP抗体偶联物,因此抑制了trFluor 650-cAMP与抗cAMP抗体的结合。 trFluor 650标记的cAMP示踪剂仅具有纳秒级的荧光寿命,而TR Fluor Eu标记的抗cAMP抗体结合的荧光cAMP示踪剂由于TR-FRET而具有更长的荧光寿命值。 FRET的大小与样品中cAMP的浓度成正比。
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