FDP [荧光素二磷酸酯四铵盐]是美国AAT Bioquest生产的荧光素 ,该产品在与磷酸酶相互作用后,无色和非荧光FDP被水解成高荧光荧光素,其表现出优异的光谱特性,与配备有氩激光激发的大多数荧光仪器的*检测相匹配。或者,FDP也可用于检测发色模式中的磷酸酶,因为酶产物(荧光素)表现出很大的消光系数(接近100,000cm-1mol-1)。在一些文献中,FDP被认为是敏感的荧光磷酸酶底物之一。FDP已广泛用于各种ELISA测定。此外,它还用于检测酪氨酸磷酸酶。FDP是热不稳定的,需要特别注意保存固体样品和储备溶液。
Mup是用于磷酸酶的荧光底物。它广泛用于检测溶液中的磷酸酶。然而,这种磷酸酶底物不适合活细胞或连续测定,因为MU(4-甲基伞形酮)是酶产物,其仅在pH值> 10时发展出*荧光。因此,也难以使用MUP检测具有酸性*pH范围的磷酸酶,例如酸性磷酸酶。
AAT Bioquest提供的CF-MUP Plus,用于解决与MUP基质相关的pH限制问题。CF-MU在pH 5.0以上表现出*荧光,因此CF-MUP底物可以很好地用于连续磷酸酶测定。它还可以用于酸性pH的测定,例如酸性磷酸酶和一些蛋白磷酸酶。
衍生自红色荧光二甲基吖啶酮(Sun Red)的磷酸酶底物仅含有单个水解敏感部分,从而避免了基于荧光素底物的双相动力学。磷酸酶催化的太阳红磷酸盐(SRP)的水解产生可以用633nm激光激发并且发射~660nm的太阳红荧光团。虽然Sun Red很容易在633 nm处激发,红色发射约为660 nm,但SRP在633 nm处的吸收非常小,没有红色发射,使SRP成为敏感的NIR磷酸酶传感器之一。请不要使用DMSO制备储备溶液,因为它会显著增加分析背景。