Cal-520 ,Cal-590 和Cal-630 提供*大的均匀荧光测定工具,用于检测细胞内钙动员。它们是荧光钙敏感染料,与现有的钙指示剂(如Fluo-3 AM,Fluo-4 AM和Rhod-2 AM)相比,具有显着改善的信噪比和细胞内保留。表达通过钙发出信号的GPCR或钙通道的细胞可以预装载可以穿过细胞膜的Cal-520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM。一旦进入细胞内,Cal 520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM的亲脂性阻断基团被细胞内酯酶切割,产生带负电荷的荧光染料,留在细胞内。它们与钙结合后的荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时,该受体表示细胞内钙的释放,这显着增加了Cal-520 ,Cal-590 或Cal-630 的荧光。高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性使Cal-520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM成为测量细胞钙的理想指标。高信噪比和更好的细胞内保留使Cal-520 ,Cal-590 或Cal-630 钙测定成为评估GPCR和钙通道靶标以及筛选其激动剂和拮抗剂的有力工具。
除了方便的激发波长和钙的大荧光增强外,Cal-520 ,Cal-590 和Cal-630 主要定位于细胞溶胶中,不像Rhod-2主要位于线粒体中。 此外,Cal-590 和Cal-630 的长Ex / Em波长使这些染料成为*的钙指示剂,与绿色荧光蛋白(GFP)细胞系的多色检测兼容。 此外,Cal-520 ,Cal-590 或Cal-630 钙测定经过优化,可与大多数现有荧光仪器兼容。 Cal-520在488 nm处可以很好地激发,并与FITC滤光片组一起使用。 Cal-590经过优化,可在555 nm激发,并与TRITC / Cy3滤光片组配合使用。 Cal-590经过优化,可在594 nm激发,并与TexasRed®滤光片组配合使用。
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