产品说明书
样品实验方案
操作步骤
以下协议适用于大多数细胞类型。这些条件需要调整每种细胞类型和实验系统。生长培养基,细胞密度,其他细胞类型和因子的存在可能影响染色。玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的染色,并导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。
稀释MycoLight Green JJ98和JJ99时使用塑料管,因为稀释的污渍粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸盐的缓冲液中获得*结果。
1.培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上原位染色。通过离心和悬浮液沉淀细胞重悬于缓冲盐溶液或水中。
2.用非磷酸盐缓冲液(如Hepes缓冲液或您选择的缓冲液)稀释MycoLight Green JJ98或JJ99。添加MycoLight Green JJ98。使用下表1中列出的浓度作为指导。在最初的实验中,*在整个建议范围内尝试几种染料浓度,以确定产生*染色的浓度。
表格1 用MycoLight Green JJ98染色细胞的建议条件
适用 | 溶度 | 染色条件 |
细菌细胞 | 50 nM - 20μM | 涡旋混合,然后孵育1-30分钟。 |
真核细胞 | 10 nM - 5μM | 孵育10-120分钟。 |
微孔板 | TE缓冲液中50nM | 孵育5分钟,冲洗干净。 |
3.染色的真核细胞通常显示弥漫性细胞质染色以及核染色。 特别是经常观察到MycoLight Green JJ98和JJ99对核内体的强烈荧光染色。
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